Nederlandse Vereniging van bioMedisch Laboratorium­medewerkers

Klik hier om de navigatie te verbergen

programma

Wat zijn en waarom doen we multiplex IF (immunofluorescentie) en IHC (immunohistochemie)? En wat is er mogelijk op een volledig open maar ook geautomatiseerd IHC systeem? Tijdens deze voordracht zullen de verschillende aspecten van de Discovery Ultra (Ventana) aan bod komen. Wat zijn de verschillen en mogelijkheden tussen chromogeen en immunofluorescentie multiplex, en wat kan van grote klinische waarde zijn. Bij de chromogeen multiplex techniek wordt gebruik gemaakt van translucente chromogenen. Dit betekent dat kleuren zullen mengen en er zo verschillende subtypes van cellen onderscheiden kunnen worden en zichtbaar onder de brightfield microscoop. Met behulp van deze techniek kan er op één objectglas een belangrijke klinisch relevante bevinding gedaan worden op basis van co-lokalisatie van verschillende markers, die misschien niet gevonden was wanneer er opvolgende gekleurde objectglaasjes worden gebruikt. De immunofluorescentie multiplex techniek werkt op basis van TSA (tyramide signaal amplificatie) en is volledig geautomatiseerd, hiermee kunnen panels gecreëerd worden tot wel 5 eiwitten (uit dezelfde host) per objectglas. Dit kan van groot belang zijn om onderzoek te doen naar bv. de response van het immuunsysteem op een tumor. Ten slotte kan er met een recent ontwikkelde assay, gekeken worden naar de aanwezigheid van twee unieke eiwitten in directe nabijheid (40 nm). Deze PLA (proximity ligation assay) kan worden gecombineerd met een IHC om zo te kunnen zien welke soort cellen eventueel met elkaar communiceren (bv. PD1+PDL1 interactie).

Download PDF